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正文:
掃描電鏡研究超微結(jié)構(gòu)分析化石花粉粒細(xì)胞壁
在超微結(jié)構(gòu)分析中,大孢子是一種常見的研究對(duì)象。大孢子個(gè)體大,
可單個(gè)處理,其外表形態(tài)及內(nèi)部壁結(jié)構(gòu)具有豐富的多樣性。這些特征為解
釋異孢型植物的系統(tǒng)發(fā)育提供了有用的資料。研究化石大孢子以來,已積
累了大量的資料。在這期間,技術(shù)上并無多大改進(jìn),只是在儀器使用和成
像系統(tǒng)方面有所進(jìn)展。
掃描電鏡(SEM)-F的超微結(jié)構(gòu)
掃描電鏡研究超微結(jié)構(gòu)不如透射電鏡,其主要原因是:在對(duì)細(xì)胞壁斷
裂面觀察時(shí),掃描電鏡的分辨率不如透射電鏡。但是,掃描電鏡成像提供
了壁的主體圖像,而在透射電鏡研究中,這些結(jié)構(gòu)只能通過綜合系列切面
獲得,化石大孢子壁最軟部分可能就看不到。在可能的條件下,透射電鏡
研究細(xì)胞壁結(jié)構(gòu)的同時(shí),應(yīng)采用掃描電鏡照片來補(bǔ)充,并做出對(duì)應(yīng)的解釋
。這種
立體像對(duì)圖像是很有效的(如Taylor,1990)。進(jìn)行掃描電鏡觀察的
細(xì)胞壁可用刀片切出新鮮斷面,而舊斷面可能會(huì)有擦痕。盡管硝酸和舒氏
液能清洗大孢子,但是其氧化反應(yīng)改變了孢粉素的化學(xué)性質(zhì),導(dǎo)致內(nèi)聚力
降低,并可能改變超微結(jié)構(gòu)。
染色劑和超薄切片機(jī)
已有許多方法應(yīng)用于對(duì)化石花粉粒超薄切片的染色中。某些研究人員
采用戊二醛處理花粉粒,并在包埋前再用鋨酸處理。但是,大多數(shù)研究者
采用在切片后染色。在化石孢粉的細(xì)微結(jié)構(gòu)研究中,最常用的染色劑是2%
的乙酸雙氧鈾、2%的高錳酸甲水溶液和0.25%的檸檬酸鉛。
玻璃刀多用于化石孢粉的切片中。但是,特別是在切片的顏色為銀色
至金黃色、而又需要特別精細(xì)的壁層結(jié)構(gòu)時(shí),金剛刀顯示了很好的優(yōu)越性
能。切片一經(jīng)切下,可用1 mmX 2mm的有槽載網(wǎng)收集,并干燥。載網(wǎng)上有一
層福爾蒙瓦爾膜。對(duì)較大花粉粒,可不必使用支持膜。在這期間,切片可
采用染色程序來進(jìn)行后染色(post-stain)。除了處理大量的花粉外,可以
采用多種染色程序,切片在不同濃度染液和不同時(shí)間內(nèi)染色。例如,對(duì)于
種子蕨花粉,用2%的高錳酸甲水溶液染色30分鐘,在黑暗中用2%的乙酸
雙氧鈾處理7小時(shí),這樣可以取得最佳效果。盡管這個(gè)過程很耗時(shí),但是是
必要的。通過試驗(yàn)不同濃度染液和不同染色時(shí)間,其結(jié)果是可以最大限度
地從切面中獲取信息。
出自http://www.bjsgyq.com/
北京顯微鏡百科
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