無(wú)關(guān)。pH靈敏度的這種特性可用于調(diào)節(jié)抗生素測(cè)定的范圍,這是因?yàn)?/div>
游離酸和游離堿是活性化合物,它們的濃度是溶液中pH的函數(shù)。
大多數(shù)抗生素在pH6。7或8的磷酸緩沖液中稀釋到測(cè)定濃度.pH6
的緩沖液用于酸性抗生素,如青霉素和頭孢菌素。pH8的緩沖液用于堿
性抗生素。測(cè)定培養(yǎng)基的pH也接近于pH7的緩沖液的pH。選擇緩沖液和
培養(yǎng)基的pH,使之提高測(cè)定方法的靈敏度。例如,青霉素G比濁法測(cè)定
,在pH6測(cè)定的靈敏度,為在pH?測(cè)定的靈敏度的1.5倍。紅霉素在pH7
測(cè)定的靈敏度為在pH6測(cè)定靈敏度的5倍。由于穩(wěn)定性的原因,四環(huán)素
在pH4.5的緩沖液中稀釋,在pH7的培養(yǎng)液中測(cè)定。當(dāng)測(cè)定穩(wěn)定的酸性
抗生素時(shí),為了獲得最大的靈敏度,應(yīng)當(dāng)采用能夠使敏感的細(xì)菌生長(zhǎng)
的低pH。
當(dāng)有些物質(zhì)對(duì)測(cè)定有干擾時(shí),必須采用其他的稀釋劑,如在莫能
菌素的測(cè)定中,鉀離子有干擾;或者如潮霉素B的測(cè)定中磷酸鹽有干擾
。應(yīng)該一直牢記,緩沖液和培養(yǎng)基的成份可能對(duì)測(cè)定產(chǎn)生干擾作用。
干擾作用通常表現(xiàn)為降低測(cè)定方法的靈敏度。
一般說(shuō)來(lái),樣品在緩沖液中稀釋倍數(shù)很大,結(jié)果樣品起始的pH并
不影響稀釋好的樣品的pH。但是,當(dāng)稀釋倍數(shù)不很大的情況下,起始
的pH就很重要。這樣在稀釋以前,應(yīng)該將pH調(diào)節(jié)到緩沖液的pH。另一
類pH起重要作用的例子,是在高緩沖容量的高濃度鹽溶液中的抗生素
的濃度相當(dāng)?shù)停鐝纳V柱上流出的洗脫液。除非樣品可以大大稀
釋,足以使其鹽類的緩沖容量降低到所用緩沖液的緩沖容量,否則無(wú)
法得到準(zhǔn)確的結(jié)果。當(dāng)發(fā)生這種情況時(shí),人們所能做的最好的事情是
認(rèn)清不準(zhǔn)確的結(jié)果的可能性,而不要對(duì)其寄予太大的希望。所有這些
討論的要點(diǎn)在于,如果希望測(cè)定結(jié)果可靠的話,樣品和標(biāo)準(zhǔn)晶必須在p
H相同和緩沖容量相同的溶液中進(jìn)行測(cè)定。幸好,這個(gè)問(wèn)題,通?梢
用樣品
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