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正文:
解剖顯微鏡下塑料包埋切片法
1. 將組織在緩沖液配制之4%的甘油醛(glutaraldehyde)里固定2-6小時(shí)。
2. 用緩沖液沖洗三次。假若組織很小則以下第一步到第七步之脫水時(shí)間可酌量縮短。
3. 30%酒精---一小時(shí)1/2
4. TBA步驟1(50%)---半天
5. TBA步驟2(70%)---半天
6. TBA步驟3(85%)---半天
7. TBA步驟4(95%)---半天
8. TBA步驟5(100%)---半天
9. 純TBA 每一步驟半天
10. 純TBA 每一步驟半天
11. 純TBA 每一步驟半天
12. 0.2%甲苯胺藍(lán)在純TBA里---半天
13. 用純TBA快速?zèng)_洗
14. 加純TBA至裝滿固定瓶的1/5容積(細(xì)胞或組織必需被TBA完全覆蓋)。然后加等量的純塑料。旋轉(zhuǎn)混合,確定塑料和TBA完全混合---半天(此時(shí)組織必須沉到固定瓶底部)。
15. 再加入等量的塑料,程序如在步驟 14---半天
16. 輕輕倒出混合物后再加純塑料---一天
17. 重復(fù)如步驟 14,如為大塊的組織,可斟增加更換純塑料的次數(shù)。
18. 在包埋容器或膠囊中,倒入純塑料及組織。確定組織在膠囊中適當(dāng)?shù)奈恢门c方向。
19. 在70℃抽真空之烤箱中聚合12至24小時(shí),視使用之塑料種類而定。
20. 自膠囊中取出,切割后黏在細(xì)木棒上,再以玻璃刀切 1-2 厚度。
21. 在涂有黏著劑的載玻片上展平或置于溫盤上使它烘干(60℃or 40℃)。
22. 于60℃下在0.2%甲苯胺藍(lán)水溶液中染色(數(shù)秒即可)。
23. 用蒸餾水淋洗并烘干。不經(jīng)封蓋玻片
解剖顯微鏡即可觀察,照相。
出自http://www.bjsgyq.com/
北京顯微鏡百科
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