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正文:

金相實驗不銹鋼的腐蝕液問題？

上海光學儀器廠：

一般不銹鋼都是比較抗腐蝕餓，所以使用一般鋼鐵用的Nital就會腐蝕的效果不好甚至無法腐蝕。我們一般用王水，

并添加甘油來做緩沖劑(ex：1part 硝酸+3part鹽酸+2part甘油)，

若為王水的話建議使用前再泡制，當天用完當天就捨棄。

另外也有使用鹽酸+苦味酸+水來使用。不過要看你是哪種不銹鋼而定。腐蝕液很多種，

抽提植物細胞的DNA方法？

材    料：

消毒過之dH2O, 4℃

液態(tài)氮

Extraction buffer

[配方]100mM Tris.Cl, pH8      100mM EDTA

250mM NaCl              100μg/ml proteinase K

10﹪(W/V)  N-lauroyl sracosine (SarKosyl)

100﹪及70﹪ethanol

TE buffer

7.5M ammonium acetate

方 法 一：

1.     取幼嫩植物組織10~30g, 以dH2O清洗, 晾乾.

2.     以液態(tài)氮將植物組織冷凍, 磨成粉.

3.     將粉裝入離心管, 加入extraction buffer (每克植物組織加10ml extraction buffer), 充分溷合. 再加入適量之10﹪SarKosyl使最終濃度成為1﹪.

4.     置55℃, 1hr.

5.     離心10min, 6,000rpm, 4℃, 保留上清, 至另一離心管中.

6.     加入上清液0.6倍的isopropanol緩緩溷合. DNA應即析出,  否則置-20℃, 30min.

7.     離心8,000rpm, 4℃, 15min, 倒去上清. 再將DNA溶于適量TE中.

8.     接下來可用純化DNA的方法純化DNA (即25：24：1之Phenol/Chloroform/isoamyl alcohol)等量溷合, 離心2,800rpm, 10min, 上清液中為DNA.

9.     將上清液轉(zhuǎn)至另一離心管中, 加入1/2倍體積量之7.5M ammonium acetate, 以及上清液量2倍之100﹪ethanol, 析出DNA. 再以2,800, 2min, 離心, 沉淀DNA, 倒去上清.

10.用70﹪ethanol洗DNA, 以去除鹽分即phenol, 倒去酒精, 將DNA溶于適量TE中.

11.將DNA保存在-20℃.

用此法所得之DNA會含有粒腺體及葉綠體中的DNA, 要想得到純植物DNA, 要用超高速離心機分離.

以此法所得之DNA量, 大約是每克植物10至40μg DNA.

出自http://www.bjsgyq.com/北京顯微鏡百科