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正文:
怎樣更清晰的觀察細(xì)胞的內(nèi)部細(xì)微結(jié)構(gòu)
染色目的:
細(xì)胞的內(nèi)部細(xì)微結(jié)構(gòu),經(jīng)過(guò)特別的染色化學(xué)藥物作用之后,會(huì)起化學(xué)反應(yīng)而產(chǎn)生特別顏色,
經(jīng)過(guò)染色的細(xì)胞其細(xì)胞核與細(xì)胞質(zhì)的細(xì)微結(jié)構(gòu),有更清楚的輪廓在
顯微鏡下辦認(rèn),以幫助作臨床診斷的參考。
檢驗(yàn)方法原理
柏式染色法主要有四個(gè)原理:
1.固定
2.核染色
3.細(xì)胞質(zhì)染色
4.透明,這些原理是用不同的溶液來(lái)進(jìn)行水化、脫水和浸潤(rùn)。
核染色:
利用蘇木紫(Hematoxylin)來(lái)染核,一般有二種方法,一種是退行性染色法,用蘇木紫(Hematoxylin)來(lái)過(guò)染,
然后用稀釋過(guò)的0.5%鹽酸來(lái)把超過(guò)的染色去除,然后用水把鹽酸沖洗掉,另一種是進(jìn)行性染色,只染到需要的顏色強(qiáng)度便停止。
酸堿平衡:利用堿性的氨水溶液(Ammonia water)來(lái)平衡前面步驟使用之鹽酸溶液之酸性。
細(xì)胞質(zhì)染色:常用的二種合成染料,第一種是Orange G (OG-6)分子量小,能很快穿透細(xì)胞質(zhì),會(huì)把角質(zhì)(keratin)染成鮮橘色,第二種是EA50,由伊紅(Eosin)和Light green所組成,伊紅染成熟的扁平細(xì)胞、核仁和纖毛,Light green染代謝性強(qiáng)細(xì)胞,如深層、中層鱗狀上皮細(xì)胞和柱狀上皮細(xì)胞染成綠色或藍(lán)色。
分色:利用1%醋酸溶液(Acetic Acid)及1%磷鉬酸溶液(Phosphotungstic Acid)將Orange G (OG-6)與EA50染在細(xì)胞質(zhì)之顏色區(qū)分。
固定:以95% Alcohol作固定液,至少30分鐘以上。
透明:最常用二甲苯(Xylene),目的是使細(xì)胞有透明度,因二甲苯(Xylene)無(wú)色,化學(xué)性為惰性,
折射率1.494,近似玻片1.515,與酒精和封片用的膠都相容的特性,能使顯微鏡的光源穿過(guò)染過(guò)色的細(xì)胞。
出自http://www.bjsgyq.com/
北京顯微鏡百科
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