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正文:
晶片觀察不同倍率可選-專業(yè)檢測(cè)
顯微鏡
不同物鏡倍率
不同收光物鏡倍率的使用,觀察區(qū)大小會(huì)跟著改變,對(duì)于
熒光訊號(hào)的收集效果也會(huì)不同。
顯微鏡使用10 倍與40 倍的物鏡,是因?yàn)榧す夤庹丈涞轿㈦姌O時(shí),微電極于針孔前的成像有所差異,
10倍收光物鏡使用1 mm 大的針孔時(shí),實(shí)際于晶片上的尺寸為34 μm,
而激光經(jīng)透鏡聚焦后其直徑為26.217 μm 的圓形,但因激光以45 度角入射晶片,
所以會(huì)變成短軸26.217 μm,長(zhǎng)軸37.075 μm 的橢圓,而微電極的間隙只有20 μm,
10 倍物鏡的觀察區(qū)34 μm,就會(huì)將微電極的激光反射光一起接收,造成接收過(guò)多無(wú)效雜訊的情形;
而40 倍物鏡的于實(shí)際晶片上的觀察區(qū)約9 μm 小于電極間隙20 μm,就可避
免接收到微電極的反射光,降低雜訊。
實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)是以1 M歐姆的訊號(hào)電阻、激光功率2 mW、光電倍增管電壓800 V、帶寬濾
鏡519~525 nm,配合不同收光物鏡倍率等設(shè)備狀態(tài)獲取單顆粒介電泳
生物晶片之制造與研究
可以發(fā)現(xiàn)熒光最大訊號(hào)放大2.8 倍,雜訊與雜訊標(biāo)準(zhǔn)差卻各下降0.3倍與0.9 倍,
訊雜比( 136=>457 )提高近 3.4 倍,
最重要的原因乃是40 倍物鏡讓熒光接收范圍變大,微電極激光反射光變小所致。
所以后續(xù)實(shí)驗(yàn)以40 倍物鏡為接收光之物鏡
出自http://www.bjsgyq.com/
北京顯微鏡百科
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