標(biāo)題：分光光度計(jì)或顯微鏡測(cè)定細(xì)胞個(gè)數(shù)-生物實(shí)驗(yàn)顯微鏡
信息分類:站內(nèi)新聞
作者:yiyi發(fā)布
時(shí)間:2013-8-27 1:08:36
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正文:
酵母菌細(xì)胞之制備
取培養(yǎng)盤上少許細(xì)胞，將其溶于3.0 mL SD medium-His培養(yǎng)液中，置于軌道震盪器(orbital shaker)上培養(yǎng)隔夜。
取100μL菌液，加上900μL培養(yǎng)液，以分光光度計(jì)波長600 nm (OD600)或顯微鏡測(cè)定，估算其細(xì)胞個(gè)數(shù)
以酵母菌的生物效應(yīng)作為環(huán)境荷爾蒙中雌性激素的偵測(cè)指標(biāo)。
試驗(yàn)將以經(jīng)過基因轉(zhuǎn)殖的酵母菌PL3作
為雌性效應(yīng)的生物測(cè)試指標(biāo)，以人造雌性荷爾蒙作為試驗(yàn)的參考物質(zhì)，并以分光光度計(jì)與顯微鏡計(jì)數(shù)細(xì)做比較，
細(xì)胞濃度過高均需經(jīng)過稀釋而后上機(jī)分析；顯微鏡計(jì)數(shù)費(fèi)時(shí)，分光光度計(jì)于細(xì)胞濃度過低偵測(cè)不到，
但較為迅速，推估數(shù)目與顯微鏡推估值相當(dāng)。以分光光度計(jì)分析選擇波長600 nm可降低培養(yǎng)液的干擾。
初始細(xì)胞濃度過高50000或100000 cell/well，若以96孔盤培養(yǎng)，因不易達(dá)混合效果，會(huì)造成細(xì)胞集結(jié)的現(xiàn)象，
造成高估的結(jié)果。人造雌性激素雌二醇與乙基雌二醇對(duì)此酵母菌增生試驗(yàn)，
以乙基雌二醇效果較雌二醇佳，生長速度較快。以乙基雌二醇做測(cè)試，
50 ppn即可促進(jìn)酵母菌PL3增生，反應(yīng)相當(dāng)靈敏
出自http://www.bjsgyq.com/北京顯微鏡百科
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