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正文:
在多光子激發(fā)熒光顯微技術(shù)中,熒光發(fā)色團是被兩個或更多的比發(fā)射光波長
更一長的光子所激發(fā)的。
因為激發(fā)只發(fā)生在
顯微鏡的焦點上,所以不對準焦點的就吸收的很少,
因此有更多的激發(fā)光到達聚焦平面。在原理上,多光子激發(fā)熒光顯微技術(shù)法有
三個主要優(yōu)點:具有很強的穿透厚樣品的能力;采用紅外光激發(fā)而實現(xiàn)對活細胞光
損傷最小化,以及減少聚焦平面外的光漂白
多光子顯微技術(shù)在改善深嵌于植物組織中的微生物細胞的成像方面具有很大的應(yīng)用
潛力。因為其他類型顯微鏡照明用的紫外光會引起植物細胞受到一定程度的光損傷,
所以多光子顯微技術(shù)對于植物表面上具有紫外吸收能力的熒光發(fā)色團標記的細菌細胞的
顯微成像非常有用。這為微生態(tài)研究入員提供更多的可用熒光發(fā)色團,來研究在植物
環(huán)境中細菌的行為。但是有證據(jù)表明,實際_仁聚焦體積內(nèi)的光漂白效應(yīng)比單光子激發(fā)
更嚴重,特別是對于薄的樣品。甚至對于綠色熒光蛋白(GFP)這種被認為是相
對穩(wěn)定的熒光分子也是如此。但是,更進一步限制該技術(shù)在植物微生物學(xué)中應(yīng)用的事
實也許是,多光子顯微技術(shù)本身的分辨率始終比單光子顯微鏡技術(shù)(如CISM )低。
盡管如此,多光子顯微技術(shù)大大改善了植物組織的三維成像效果,但實際上
該技術(shù)僅適用于尺寸較大的微生物的成像,而不適用于細菌。據(jù)我們所知,目前多光
子顯微技術(shù)主要應(yīng)用于微生物學(xué)生物膜的研究上。隨著價格低廉的多光子顯微鏡的推出,
時間會告訴我們多光子顯微技術(shù)是否有利于對植物
表面上或內(nèi)部的細菌細胞進行成像。
出自http://www.bjsgyq.com/
北京顯微鏡百科
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