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正文:
胚胎分割可分為械微操作儀分割和徒手分割兩種。
1.顯微操作儀分割使用顯微操作儀切割胚胎時(shí),可根據(jù)習(xí)慣將胚
胎固定吸管安裝于操作臺(tái)左側(cè)器械支架上,切割刀或切割針安裝于右
側(cè)。通過顯微鏡觀察胚胎,調(diào)節(jié)機(jī)械手粗調(diào),使操作器接近胚胎并處
于最適操作角度;再調(diào)節(jié)顯微注射器負(fù)壓,使周定吸管吸住欲分割的
胚胎以作固定;通過操作手柄將胚胎內(nèi)細(xì)胞團(tuán)從中央切開。采用切割
針切割時(shí),通過操作手柄把針的切割邯置于胚胎正上方適當(dāng)施壓,當(dāng)
針接觸到皿底時(shí),稍加來回抽動(dòng),即可使胚胎一分為二。
如果分割后的胚胎需要裝入透明帶,為節(jié)省透明帶和簡(jiǎn)化操作。
不要把被切割胚胎的透明帶切成兩半,可只作一切口,吸出半個(gè)胚胎,
使原有透明帶留一半胚胎。另一半重新裝帶或用瓊脂封固即可移植。
2.徒手分割該法。
在90mm塑料培養(yǎng)皿內(nèi),做數(shù)個(gè)100 μm.培養(yǎng)液微滴,置于實(shí)體顯微鏡載物臺(tái)上,
移一枚胚胎入液滴,用右手拇指和食指捏好刀片,角度以能接觸皿底為宜,
先用刀片在含有胚胎的液滴平皿底部輕輕劃一痕,把胚胎撥移至痕跡
線上,刀刃在胚胎巾部由上至下將胚胎一分為二,再用吸管吸取兩枚
半胚洗凈后裝管移植。
出自http://www.bjsgyq.com/
北京顯微鏡百科
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