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正文:
ATP可以從微
生物培養(yǎng)物中通過溶解細(xì)胞提取-
熒光顯微鏡
多反應(yīng)在理論上應(yīng)能用于ATP 的
測(cè)量,最簡(jiǎn)單
熒光素——含氮和硫
的芳香屬分子,在鎂的存在下能與ATP 和蟲熒光酶反應(yīng)形成一種酶——
蟲熒光素——單磷酸腺苷的中間物,此中間物在氧氣的存在下分解產(chǎn)生
游離的單磷酸腺苷,無機(jī)磷和光,在反應(yīng)的最初15秒鐘發(fā)射出明顯的光,
之后發(fā)射光持續(xù)平穩(wěn)1-3 分鐘,發(fā)射光用分光計(jì)或閃爍計(jì)數(shù)器測(cè)量并
對(duì)ATP 含量作圖繪成標(biāo)準(zhǔn)曲線,如果使用的是純蟲熒光素酶和蟲熒光素
而不是熒火尾部的不純物,光輸出有所擴(kuò)大并且是恒定的。
ATP 可以從
微生物培養(yǎng)物中通過溶解細(xì)胞提取,對(duì)于純培養(yǎng)物,可
用煮沸、加酸和氯仿來提取ATP ,在土壤和沉積物中,煮沸不能使細(xì)胞
完全溶解,說明細(xì)胞受到粘土膠體的保護(hù),0.5MNaHCO 中加氯仿對(duì)鈣質(zhì)
土中ATP 的提取是有效的,但ATP 酶不是都受到抑制,結(jié)果所提取的ATP
量很低,陰離子和陽(yáng)離子混合提取劑是有用的,大多數(shù)提取劑在一定程
度上抑制蟲熒光素酶反應(yīng),因此,提取溶液在放入ATP 光度計(jì)之前盡可
能多烯釋。
出自http://www.bjsgyq.com/
北京顯微鏡百科
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