標(biāo)題：大多數(shù)酵母載體都是能穿梭于酵母和細(xì)菌之間
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作者:yiyi發(fā)布
時(shí)間:2016-8-29 0:19:32
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正文:
大多數(shù)酵母載體都是能穿梭于酵母和細(xì)菌之間
培養(yǎng)酵母菌既簡(jiǎn)單、經(jīng)濟(jì)，又十分快捷，在營(yíng)養(yǎng)豐富的培養(yǎng)基
中，大約90min的時(shí)間即可增殖一代。
支持酵母菌染色體功能的三種基本結(jié)構(gòu)元件已經(jīng)被確認(rèn)和克隆
，它們分別是復(fù)制起點(diǎn)(ARS元件)、著絲粒(CEN元件)和端粒(telom
ere，TEL)。已經(jīng)利用這些克隆化的元件構(gòu)建了酵母人工染色體，
并應(yīng)用于各種染色體行為的研究。利用這些結(jié)構(gòu)元件，再加上克隆
化的酵母菌選擇標(biāo)記與大腸桿菌載體融合構(gòu)建成穿梭載體，能分別
在大腸桿菌和酵母菌中自主復(fù)制并穩(wěn)定存在。
大多數(shù)酵母載體都是能穿梭于酵母和細(xì)菌之間的穿梭載體。根
據(jù)不同用途，可分為克隆載體、表達(dá)載體、轉(zhuǎn)導(dǎo)載體和用于誘變的
載體。根據(jù)復(fù)制方式，酵母載體也可分為兩類。一類是整合載體，
這種載體在酵母中不能自我復(fù)制，只能通過(guò)同源重組整合到染色體
中而得以保存。這類載體的優(yōu)點(diǎn)是某個(gè)基因一旦被克隆和整合之后
，將隨染色體DNA而分離。因此該基因在細(xì)胞分裂時(shí)會(huì)更穩(wěn)定。另
一類載體(它包括酵母著絲點(diǎn)序列)，一般在克隆時(shí)作為一個(gè)CEN／A
RS盒，這類載體同時(shí)具有自我復(fù)制能力并且在細(xì)胞分裂時(shí)較穩(wěn)定。
酵母分子生物學(xué)研究中常常要分離質(zhì)粒和酵母染色體DNA，質(zhì)
粒DNA用來(lái)轉(zhuǎn)化大腸桿菌，而染色體DNA則用于Southern雜交分析、
PCR擴(kuò)增和整合性質(zhì)的質(zhì)粒的克隆等。下面分別介紹酵母細(xì)胞質(zhì)粒D
NA和染色體DNA的分離方法。
出自http://www.bjsgyq.com/北京顯微鏡百科
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