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正文:
生物實(shí)驗(yàn)中的透析與超濾技術(shù)的應(yīng)用
透析與超濾
透析與超濾的基礎(chǔ)是半透膜的存在允許小的化合物(低的分子質(zhì)量)
流過(guò)同時(shí)阻止大的分子如蛋白質(zhì)的滲透。兩種方法都用于蛋白質(zhì)的純化
而超濾主要用于蛋白質(zhì)的濃縮。
透析一般用于處理掉小分子質(zhì)量的污染物或換掉蛋白質(zhì)溶液的緩沖
液。蛋白質(zhì)溶液被裝在兩端都密封的透析管中,然后透析管被放入更大
體積的緩沖液中。小分子質(zhì)量的污染物通過(guò)膜擴(kuò)散到外面而
大的蛋白質(zhì)留在透析管中。相似的,透析管內(nèi)外的緩沖液通過(guò)擴(kuò)散而交
換直到內(nèi)外達(dá)到平衡。這個(gè)平衡是由唐南效應(yīng)控制的,它保持膜兩邊的
電中性。對(duì)于多價(jià)離子如蛋白質(zhì),這種作用意味著相反電荷的離子會(huì)與
蛋白質(zhì)相互作用,溶液的離子強(qiáng)度不會(huì)嚴(yán)格地降到與本體溶液相同。對(duì)
于稀釋的蛋白質(zhì)溶液加上表面的高的離子濃度,唐南效應(yīng)是可以忽略的
。但是對(duì)于高濃度蛋白質(zhì)或低離子強(qiáng)度的緩沖液,它在離子的依數(shù)性上
有很明顯的作用。盡管有這些復(fù)雜的因素,透析管里的緩沖液逐漸被外
面更大體積的溶液所替換。通過(guò)在規(guī)則的時(shí)間間隔內(nèi)替換外面體積的緩
沖液,這個(gè)過(guò)程可以很快的處理掉小分子質(zhì)量的污染物或換掉蛋白質(zhì)溶
液的緩沖液。
出自http://www.bjsgyq.com/
北京顯微鏡百科
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