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正文:
線粒體
大鼠肝臟和牛心臟是用于呼吸研究的線粒體的常用來源。在這
些研究中,細胞器的產(chǎn)量并不是主要考慮的,取而代之的是方法本
身要求盡可能得快速和溫和。使用良好的介質和僅3000g離心力來
制備“重組分”線粒體就符合以上要求。密度梯度離心可以實現(xiàn)從
“重+輕線粒體”組分中更完整地回收線粒體。由于蔗糖梯度溶液
具有高摩爾滲透壓濃度,線粒體、溶酶體和過氧化物酶體的密度范
圍有相當大部分的重疊。Percolr和Nycodenz以及碘克沙醇的等滲
梯度溶液提供了更優(yōu)越的分辨率。Nycodenz中線粒體的密度比碘克
沙醇稍高一點,因此提高了它們與較輕的溶酶體的分辨率。由于酵
母線粒體目前廣泛用于許多功能和結構研究之中,實驗方案4.9描
述了廣泛應用的這些線粒體在Ny—codenz@梯度溶液中的純化過程
。在底部上樣的不連續(xù)梯度溶液中漂浮分離通常會提高分辨率,這
種方法現(xiàn)在已應用于酵母線粒體分離。然而,觀察哺乳動物線粒體
發(fā)現(xiàn),將粗制的線粒體組分放于梯度溶液底部時,高流體靜壓會導
致線粒體結構的部分破裂
也可參看實驗方案,該方案描述了用于從輕線粒
體組分中純化所有主要細胞器的梯度溶液。
出自http://www.bjsgyq.com/
北京顯微鏡百科