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正文:
海洋微型生物研究光學(xué)顯微鏡-顯微技術(shù)
微型生物個體極小,成為阻礙研究發(fā)展的攔路虎。微型生物的研究
進程在很大程度上取決于技術(shù)的進步。從技術(shù)手段上說,微型生物
研究舞臺上演了三部曲:以顯微技術(shù)為基礎(chǔ)的觀察分析,以流式細
胞技術(shù)為基礎(chǔ)的快速定量,以分子生物學(xué)技術(shù)為基礎(chǔ)的多樣性分析
與功能基因分析。顯微技術(shù)(Microscopy)
沒有顯微鏡就沒有海洋微型生物研究。
20世紀(jì)80年代以前,在微型生物研究技術(shù)舞臺上顯微鏡是絕對的
主角,直到今天,顯微技術(shù)仍然是微型生物研究必不可少的手段。
這里只簡介最常用的透射電子顯微技術(shù)(Transmission E1ectronic
Microscopy,TEM)和表面(落式)
熒光顯微技術(shù)(Epifluorescence
Microscopy,EFM)。
TEM是了解生物體亞顯微結(jié)構(gòu)的可靠方法。大洋環(huán)境中聚球藻
的發(fā)現(xiàn)和確認(rèn)就是TEM觀察的結(jié)果。TEM在原綠球藻的發(fā)現(xiàn)和定種上
也起到了至關(guān)重要的作用。目前,海洋病毒的觀察、分類工作仍主
要由TEM來完成。TEM方法可以觀測到包含有病毒粒子的尚未裂解的
細胞,為微食物環(huán)(Microbialloop)和病毒環(huán)(Virus 100p)的研究
提供了重要參數(shù),具有其他方法無法超越的優(yōu)勢。但是TEM由于其
制樣和觀測的復(fù)雜性,不適用于自然生態(tài)調(diào)查中超微型浮游生物群
落的定量研究。
與TEM相比,EFM觀測需要的水樣量小,制樣過程簡單,觀察和
操作快速。采用熒光染色的方法,EFM能區(qū)分并定量細菌、藍細菌
和真核細胞。盡管細胞經(jīng)過固定染色處理后大小會改變,尤其是甲
醛固定會造成細胞收縮,染色后細胞大小的測定也會由于熒光的光
暈而受到干擾,但是EFM在細胞的大小和形態(tài)觀測上仍具有一定的
優(yōu)勢。值得注意的是,在沒有改進的EFM技術(shù)規(guī)程中,原綠球藻往
往會被誤計為細菌其在貧營養(yǎng)大洋造成的細菌正誤差可達30%
出自http://www.bjsgyq.com/
北京顯微鏡百科
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