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正文:
大多數(shù)綠色菜葉的色譜圖上會顯示出類胡蘿卜素
步驟:色素的色譜分離
(1)制備展開劑。取lmL正丁醇到lOOmL容量瓶中,并用石油醚
定容,搖勻。注意:遠(yuǎn)離火源。
(2)向15em的試管中倒上述展開劑約1.3cm,用軟木塞塞住。
(3)將Whatman 1號濾紙剪成15cm長1.3cm寬的長條。在長條一
端1.3cm處折出一條橫線,用鉛筆在橫線中心及長條另一端1.3cm
處的中心各點一點。
(4)用微型移液管或毛細(xì)管向濾紙條上做標(biāo)記的點的位置滴一
小滴色素的石油醚提取物,點樣量要足夠小,直徑在0.5cm內(nèi)。在
相同的點上重復(fù)點樣4~8次,每次點完后干燥幾秒鐘,讓溶劑充分
揮發(fā),然后再點樣?梢韵扔盟闉V紙片進(jìn)行訓(xùn)練。
(5)用一個大頭針將濾紙條從褶縫中心的點釘在木塞底部,確
保濾紙條要垂直懸掛。
(6)將濾紙條放入裝有展開劑的試管中。展開劑要接觸到濾紙
條頂端,但要低于點樣處。
(7)讓展開劑向上展開,直到色素分離。
(8)大多數(shù)綠色菜葉的色譜圖上會顯示出類胡蘿卜素(它會隨著
展開劑的前沿推移,距離底部最遠(yuǎn))。藍(lán)綠色的葉綠素a比橄欖綠的
葉綠素b距離濾紙底部遠(yuǎn)(即葉綠素a展開更快),在葉綠素a前面可
能會觀察到脫鎂葉綠素a的灰色帶。色譜圖上可能還會顯示出黃色
的葉黃素的點或帶。
(9)畫出色譜圖,并將各點標(biāo)記出來。薄層色譜
作為一種替代紙層析色譜的方法,薄層色譜可用于分離菠菜色
素。在距離硅膠板的底部約1.5cm處點L含菠菜色素的石油醚提取
物,點樣直徑在l cm以內(nèi)。
當(dāng)點樣點徹底干燥后,將硅膠板放入含有溶劑(石油醚一異丙
醇一水,100:5:0.25,體積比)的層析缸中。該溶劑的制備方法
是:將異丙醇加入水中,混合后再加入石油醚。溶劑的深度一定要
低于點樣點的位置:當(dāng)溶劑前沿展開至離點樣點約15cm時,從層析
缸中移出硅膠板,干燥硅膠板:
鑒別盡可能多的色素。
出自http://www.bjsgyq.com/
北京顯微鏡百科
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