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分光光度計吸光度的校正方法和步驟！

　　　　當(dāng)進(jìn)行分析檢查如果不用化學(xué)性標(biāo)準(zhǔn)物,其吸光度之準(zhǔn)確便成為分析時

　　直接的依據(jù),而影響吸光度差異,主要有波長,迷光(stray light),光源老化以及波寬

　　(bandwidth),常使用標(biāo)準(zhǔn)濾鏡(如 NBS,SRM 930)或是配製標(biāo)準(zhǔn)溶液(如potassium

　　dichromate,cobalt ammonium sulfate,pot. nitrate) 作為校正吸光度之方法。其中

　　pot. dichromate solution 是使用最多的一個方法。

　　1、校正頻率 : 每3個月校正一次。

　　2、藥品配製 : (acid pot. dichromate solution)

　　　　(1)從desicater中取出potassium dichromate(NBS SRM 935)

　　　　(2)稱空的1L體積瓶重量歸零。

　　　　(3)分別精確稱取20mg,40mg,60mg,80mg及100mg的Pot. Dichromate。

　　　　(4)慢慢加入0.001N HClO4 Solution(in H2O),直到1kg (±0.01g)。

　　　　(5)溷合均勻,放入棕色容器,避光保存并且于當(dāng)天完成校正工作。

　　3、校正方法 :

　　　　(1)cuvette先于36N sufuric acid浸置1-2小時后 ,依序以 24N,12N,6N的sufuric

　　　　　acid,及蒸餾水沖洗cuvette后慢慢陰乾。

　　　　(2)分光光度計溫機(jī)至少30分鐘。

　　　　(3)以拭鏡紙擦拭cuvette后,慢慢插入cell holder 中(直到校正完,才能再取出

　　　　　或移動)。

　　　　(4)依(表二)選擇波長及波寬,并記錄校正時的室溫(t)。

　　　　(5)以玻璃製dispossable dropper取0.001N HClO4 rinse cuvette 5次,第6次

　　　　　放入后立即加蓋,歸零。

　　　　(6)同樣方法依(表二),分別吸取不同濃度之potassium dichromate測定各濃度

　　　　　下之吸光度。

　　　　(7)測得之吸光度(A)代入 ε(t)= A/b*c,并依(表三)調(diào)整溫度至ε(23.5)℃ 。

　　4、判別:

　　　　(1)若band width與(表二)同則以在(表二)所列ε(23.5) uncertainty范圍為

　　　　　準(zhǔn)確吸光度。

　　　　(2)bandwidth=5-8nm則ε(23.5)誤差<3%則可接受。

　　5、不準(zhǔn)確時處理方式:

　　　　(1)檢查溶液配製是否有誤。

　　　　(2)檢查cuvette是否乾淨(jìng)或放置不當(dāng)。

　　　　(3)儀器是否加蓋緊密。

　　　　(4)檢查bandwidth 。

　　　　(5)校正波長。

　　　　(6)換Lamp source 。

　　　　(7)若檢查以上因素仍無法改善,則請廠商工程師維修。

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