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當選擇FP數(shù)字成像用的濾光片組時,考慮濾光片使用的方式會很有幫助。例如,
當使用濾光片在肉眼下區(qū)分熒光時,這是倒置寬視場顯微鏡或熒光立體顯微鏡的常用
觀察情形,考慮的重點就是收集盡可能多的來自于樣品的熒光,這一點于作常重要,因為
肉眼對于進來的光相對不敏感,但是卻可以非常精確地區(qū)分不同顏色。因此,用于肉
眼觀測FP的濾光片應該是寬潛帶的濾光片。而對于數(shù)字成像,重點又是截然不同的,
因為檢測器無法區(qū)分散射出的光子顏色。因此,對于CCD芯片和光電倍增管(PTM )
檢測器來說,最好的濾光片是針對被檢測FP的發(fā)射光的窄譜帶濾光片(Piston et al.
1999).現(xiàn)在可以從濾光片制造商處購買到各種高質(zhì)址的濾光片組,許多這些濾光片組
是針對單色或多色FP成像特制的。讀者可以參考濾光片制造商的網(wǎng)站
當FP強度很低或者表達水平必須控制在最低水平時,就需要考慮高效率的CCD
相機。如果時間分辨率非常重要,那么電子倍增CCD可以提供有效的解決辦法,雖然
這種辦法很昂貴。最近在PMT技術中的突破,已經(jīng)大大提高了激光掃描共聚焦顯微鏡
的檢測效率,使用原系統(tǒng)很難做的實驗現(xiàn)在可以用新型共聚焦顯微鏡輕易完成。雖然
以上討淪了一些活細胞成像需考慮的要點,但最終結果的好壞還要歸結到信噪比。
出自http://www.bjsgyq.com/
北京顯微鏡百科
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