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正文:
盡管電子
顯微鏡的分辨本領(lǐng)很高-細(xì)胞的細(xì)微結(jié)構(gòu)
人們要研究病毒侵染的細(xì)胞與健康細(xì)胞的細(xì)微結(jié)構(gòu),或是
病毒質(zhì)粒在細(xì)胞中存在部位時(shí),一般是把一小片細(xì)胞組織用適
當(dāng)試劑固定.制成超薄切片,才能進(jìn)行電子顯微鏡觀察。
這是因?yàn)楸M管電子顯微鏡的分辨本領(lǐng)很高.但電子穿透力卻很弱,
樣品切片太厚,電子穿不過(guò)被吸收無(wú)法成像.
超薄切片技術(shù)包括取材、固定、脫水、滲透、包埋、聚合、切
片和染色幾個(gè)環(huán)節(jié),簡(jiǎn)單概括為:將
生物組織用醛,例如,戊二
醛溶液固定,然后用餓酸或四氧化餓再固定。隨后使樣品脫水并
浸入待固化的硬塑料混合劑中包埋,待保溫聚合、固化成型后即
可使用。所用的硬塑料有環(huán)氧樹(shù)脂和各種甲基丙烯酸酷。包埋好
的組織塊可用玻璃刀或金剛刀切成厚度為50-100 nm的薄片。
然后將所得切片用鈾與鉛鹽染色后進(jìn)行電子顯微鏡觀察。如果選
用某些包埋介質(zhì),制得切片可以用專一的酶或染色劑處理,就更
利于識(shí)別某些特殊的化合物。如果細(xì)胞在固定之前吸收了同位素
標(biāo)記的化合物,則樣品可以用放射性敏感的薄膜覆蓋,以便確定
放射性示蹤化合物的位置。若切片中含有抗原性物質(zhì),則可以用
鐵蛋白標(biāo)記的抗體定位。由于超薄切片技術(shù)環(huán)節(jié)多,要求復(fù)雜,
因此在植物脫毒無(wú)病毒苗檢測(cè)上,現(xiàn)在很少采用此法,而多用負(fù)
染色技術(shù)。
出自http://www.bjsgyq.com/
北京顯微鏡百科
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