信息分類:技術(shù)文章
作者:顧怡婷發(fā)布
時(shí)間:2011/9/23 18:06:18
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螢光顯微鏡的結(jié)構(gòu)和配件
1. 必要的條件
螢光顯微鏡為了利用上述的螢光特徵,因此比之普通顯微鏡還需要具備下列條件。
A. 光學(xué)暗視野
通常螢光的強(qiáng)度和激勵(lì)光相比,是極微弱的(10-3 ~ 10-5 )如果螢光和激勵(lì)光相疊加,反差就會(huì)極度地減弱,因此,必須把激勵(lì)光和螢光徹底地分離出來。
B. 必須有短波長區(qū)(近紫外區(qū))并用一種高強(qiáng)度的光源。
C. 必須有合適的濾光鏡組合,以適應(yīng)各種需要的目的。
D. 必須安全和便利操作(由于光源的高溫和有害的紫外光)。
E. 必須對(duì)螢光衰褪現(xiàn)象,有合適的防止措施。
2. 光源
由于螢光和激勵(lì)光相比,是非常微弱的,因此螢光顯微鏡的光源強(qiáng)度必須很高,即使在近紫外區(qū),也必須有足夠的強(qiáng)度,為了滿足上述要求,通常採用高壓汞燈,但有時(shí)為了特殊需要,也採用氙燈或鹵素?zé)簟?/p>
A. 高壓汞燈
該燈發(fā)射出波峰窄的發(fā)光光譜,螢光顯微鏡是利用它的紫外- 短波區(qū)的光線。
常用的有200W、100W和50W三種不同型號(hào)的燈,但每種的強(qiáng)度和光弧形狀都不一樣,必須根據(jù)照明系統(tǒng)的情況,選擇合適的型號(hào)。
HBO-1OOW 0.25 × 0.25mm 170.000 cd/cm
HBO-200w 2.0 × 0.6 mm 33.000 cd/cm
B. 氙燈(XBO)
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該燈與高壓汞燈不一樣,自紫外至近紅外區(qū)是一條連續(xù)光譜。同時(shí),特別在可見區(qū),這燈和自然光十分相似。因此,它適用于螢光光度法中,作測定激發(fā)和螢光光譜之用。
汞燈和氙燈都是放電電弧,在玻璃管中封入一對(duì)電極和一些特定物質(zhì),并使電極之間放電。根據(jù)激發(fā)和壓力條件,封入的物質(zhì)(氣體)輻射出一種特定的光譜。需要有高電壓當(dāng)然代價(jià)也貴了。
C. 鹵素?zé)?/p>
是一種光學(xué)顯微鏡作為光源最常用的燈。它和放電燈相比,使用方便,價(jià)格便宜,因此可用在不需要紫外線區(qū)或高光強(qiáng)激勵(lì)光的觀察中(如FITC)。
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