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正文:
在光學(xué)
顯微鏡下用油鏡鏡頭觀察標(biāo)本包埋及制備
支架的制備
一張醋酸纖維膜切到比玻璃載片略小一些。在玻璃載片上倒一薄層丙
酮,并將醋酸纖維膜壓在玻璃載片上,使其干燥,接著在醋酸纖維膜上覆
蓋一薄層“Araldite'’液,“Araldite"液在醋酸纖維膜上散開(kāi),正好超
出醋酸纖維膜到玻璃載片上,并逐漸變硬。因?yàn)?Araldite"液對(duì)醋酸纖維
膜封片是一個(gè)重要的步驟,其后將整個(gè)被封固的玻璃載片都浸在丙酮中
揭片的包埋及制備
揭片用低濃度酸蝕刻來(lái)制備,并對(duì)修塊的表面仔細(xì)修理,主要根據(jù)上
述3種方法中的一種,同時(shí)盡可能保持細(xì)胞壁物質(zhì)完好。接下來(lái)將揭片從巖
體上取下,將薄層Araldite液擴(kuò)散到含有機(jī)質(zhì)的醋酸纖維膜邊緣。加熱到5
5~C,使Araldite液成流動(dòng)液體,接著牢牢地按到已制備的Araldite支架表
面,并讓其固定。將玻璃薄片放人有丙酮的浴鍋中(帶有攪拌器)15分鐘,
以完全分解揭片上的醋酸纖維膜,只留下有機(jī)質(zhì)。
接著對(duì)有機(jī)質(zhì)用0.05%的鹽酸作用1—2小時(shí),以去掉殘留的方解石碎
屑,注意避免損壞細(xì)胞壁。在光學(xué)顯微鏡下用油鏡鏡頭觀察標(biāo)本,油可以
直接加到標(biāo)本表面,看后擦去。
在光學(xué)顯微鏡檢查后,標(biāo)本的特定部分可從底部支架的醋酸纖維膜上
切下(這是因?yàn)橹車葾raldite包圍而不受丙酮影響),并與玻璃薄片分離
。接著放到合適的電鏡座上作掃描電鏡觀察,或制成包埋塊,進(jìn)一步切片
,作透射電鏡觀察。這個(gè)技術(shù)的優(yōu)點(diǎn)之一是,標(biāo)本能在高倍率下用不同類
型的顯微鏡查看,以證實(shí)或小心排除潛在的假象。
出自http://www.bjsgyq.com/
北京顯微鏡百科
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